Tiêu chuẩn ngành 10 TCN 191:1994 về vacxin thú y - Quy trình kiểm nghiệm vacxin dại cố định

TIÊU CHUẨN NGÀNH

10 TCN 191:1994

VACXIN THÚ Y

QUY TRÌNH KIỂM NGHIỆM VACXIN DẠI CỐ ĐỊNH

Quy trình này áp dụng cho việc kiểm nghiệm vacxin chế từ não bê đã được gây nhiễm virút dại cố định và vô  bằng phương pháp thích hợp. Vacxin có dạng lỏng hoặc khô.

1. Mẫu: Theo 10 TCN 160-92

2. Kiểm tra thuần khiết: Theo 10 TC N 161 - 92

3. Kiểm tra toàn:

3.1. Phương pháp trọng tài: Tiêm cho 2 chó mẫn cảm (3 tháng tuổi) mỗi con 2 liều vacxin sử dụng phương pháp qui định.

3.2. Phương pháp thay thế: Tiêm vào xoang bụng hoặc dưới da cho 3 chuột nhắt trắng (18 - 20g) mỗi con 1/10 liều vacxin sử dụng và 2 chuột (250 - 350g) mỗi con 1 liều sử dụng.

4. Kiểm tra hiệu lực:

4.1. Phương pháp trọng tài: Gây miễn dịch cho 60 chuột nhắt trắng (15 - 16g) bằng cách tiêm xoang bụng, trong hai tuần liền, mỗi tuần 3 lần, mỗi lần 0,25 ml vacxin cho một chuột (tổng số 6 lần). Sau 14 ngày kể từ lần tiêm thứ nhất, chuột miễn dịch được thử thách với virut dại cường độc CVS (Challenge virus Standara) theo 5 nhóm, mỗi nhóm 10 con với liều 10^-1 10^-2... 10^-5. Đồng thời chuột đối chứng cũng được tiêm cường độc theo 3 nhóm mỗi nhóm 10 con, liều 10^-5, 10^-6 và 10^-7, đường tiêm não (intracerebrally), lượng tiêm 0,03 ml. Theo dõi trong 14 ngày, chỉ tính những chuột chết và bại liệt từ ngày thứ năm trở đi, LD₅₀ của 2 lô chuột đối chứng và miễn dịch phải khác nhau ít nhất 3 log thì vacxin được xem là đạt tiêu chuẩn hiệu lực.

4.2. Phương pháp thay thế: Dùng 8 chuột (250 - 300g) chia làm 4 nhóm mỗi nhóm 2 con. Chuột được tiêm vacxin vào não sơ đồ sau:

- Nhóm l: Liều tiêm bằng 1/150 liều sử dụng LSD vacxin 1/50.

- Nhóm 2: Liều tiêm bằng 1/l500 LSD, vacxin pha 1/500

- Nhóm 3: Liều tiêm bằng 1/15.000 LSD, vacxin 1/5.000

- Nhóm 4: Liều tiêm bằng 1/150.000 LSD, vacxin 1/50.000.

 * Theo dõi trong 14 ngày, vacxin đạt tiêu chuẩn hiệu lực nếu:

- Nhóm l: Chuột chết hết.

- Nhóm 2 và 3: Chuột có thể sống hoặc chết.

- Nhóm 4: Chuột sống cả hai con.